TINCIÓN DE WRIGHT

Fecha: 13 de noviembre, 2014.

Fundamento: Realizar una tinción de Wright para la visualización de las diferentes estructuras celulares.

Material: microscopio, cristalizador, puentes de tinción, pipetas Pasteur, tubos de ensayo, gradilla, portaobjetos.

Reactivos y sustancias: solución de Wright, solución tampón pH 7’2, aceite de inmersión.

Muestra: Sangre capilar o sangre venosa anticoagulada.

Desarrollo:

-Realizamos una extensión sanguínea muy fina (véase Práctica VII).

-Sobre el cristalizador colocamos el puente de tinción y sobre este la extensión.

-Sobre la extensión, le añadimos 1 ml de Wright y lo dejamos actuar durante 1 minuto.

-Pasado el minuto, lavamos la extensión con solución tampón pH 7’2 y la dejamos escurrir en posición vertical.

-En un tubo de ensayo, diluimos 0’5 ml de Wright con 0’5 ml de solución tampón pH 7’2 y lo mezclamos bien.

-Cubrimos la extensión, con una pipeta pasteur, con la disolución y la dejamos actuar entre 3 y 5 minutos.

-Pasado este tiempo, lavamos la extensión con agua del grifo y después la lavamos con solución tampón pH 7’2, y la dejamos secar en posición vertical.

-Una vez seca la extensión,  le añadimos una gota de aceite de inmersión para observar con el objetivo de 100x en el microscopio.

Observaciones: Igual que en la tinción de Giemsa, no se pueden observar glóbulos blancos ya que la sangre utilizada lleva bastante tiempo en el frigorífico.

Resultados:

Interpretación de los resultados: Se puede observar prácticamente igual que en la tinción de Giemsa (Práctica IX), los eritrocitos se tiñen de color rosado oscuro y las plaquetas de color violeta.

Hoja de trabajo:

1.¿Qué tipo de colorante utilizamos en esta tinción? Utilizamos colorante Wright

2.¿Qué sustancia empleamos como fijador? Como el colorante contiene metanol no es necesario un paso previo de fijación.

3.¿Cuánto tiempo debe estar en contacto el frotis con el colorante diluido? Debe estar entre 3 y 5 minutos.