FÓRMULA LEUCOCITARIA

Fecha: 01 de diciembre,2014.

Fundamento: Determinar el porcentaje que representa cada uno de los tipos de leucocitos con respecto al total de ellos con la fórmula leucocitaria.

Material: microscopio, papel, lápiz, portaobjetos, duquesitas y frasco lavador.

Reactivos: solución alcohólica de triarilmetano, solución tamponada de xanteno, solución tamponada de tiazina, agua destilada, aceite de inmersión. 

Muestra: Sangre capilar

Desarrollo:
-Realizamos una extensión y la teñimos con panóptico rápido (véase práctica XI).
-Preparamos el microscopio para que tenga el condensador alto y el diafragma abierto.
-Enfocamos la preparación y la observamos con el objetivo pequeño.
-Buscamos una zona en la que los hematíes no estén superpuestos y los leucocitos se encuentren uniformemente distribuidos.
-Observamos esa zona de la preparación y vamos describiendo un recorrido en forma de almenas o de greca.
-Mientras observamos por el microscopio vamos anotando el número y tipos de leucocitos.

Observaciones: El número de leucocitos que se cuentan es 100. Para calcular el número de cada uno de los tipos de leucocitos se aplica una fórmula (escrita en los resultados)

Resultados:

Neutrofilos cayados: 14; Neutrofilos segmentados: 56; Linfocitos: 14; Monocitos: 9; Eosinofilos: 0; Basofilo: 3.

Interpretación de los resultados: Al hacer los cálculos podemos observar que los resultados de proporción es normal, aunque hay un poco más de basófilos de lo normal y linfocitos mas bajos. Eso se puede deberse a que el sujejo debe estar enfermo (resfriado, etc.)

Hoja de trabajo:
1.¿Con qué objetivo se observan los leucocitos cuando se determina una fórmula leucocitaria?  100x
2.¿Cómo es el recorrido que se describe en la observación leucocitaria?  En forma de almenas o de grecas.
3.¿Cuándo se han de observar al menos 200 leucocitos? Cuando se encuentran más linfocitos que neutrófilos o más del 10% de eosinofilos o más del 12% de monocitos.
4.Si de 100 leucocitos observados, 20 son linfocitos y el WBC es igual a 7.000 leucocitos/mm3 de sangre, ¿Cuál es el número que hay en 1 mm3 de sangre? n°TL=7.000×20/100=1.400 linfocitos/ mm3 de sangre.
5.¿Cómo se llama el aumento de los monocitos? Monocitosis.

DETECCIÓN DE CUERPOS DE HEINZ

Fecha: 28 de noviembre,2014.

Fundamento: Detectar cuerpos de Heinz con el microscopio.

Material: Tubo de ensayo, pipeta Pasteur, pipeta automática, baño de agua, portaobjetos, microscopio, vaso de precipitado, varilla, papel de filtro, parafilm, probeta y embudo.

Reactivos: cristal violeta, agua destilada, suero fisiológico y aceite de inmersión. 

Muestra: Sangre total

Desarrollo:
-Preparamos el colorante:

• Mezclamos 20 ml de la solución de cristal violeta, 20 ml de agua destilada y 20 ml de suero fisiológico. 
• Lo filtramos y lo vertemos en un tarro (previamente etiquetado. 

-En un tubo de ensayo, echamos volúmenes iguales de colorante y sangre. En nuestro caso 1 ml de sangre y un ml de colorante.

-Homogenizamos la mezcla, tapamos el tubo con parafilm y lo metemos en el baño de agua a 37°C durante 5 minutos.

-Pasado este tiempo lo sacamos y colocamos una gota en un portaobjetos.

-Hacemos una extensión y la dejamos secar.

-Observamos pa extensión con el microscopio, con el objetivo de inmersión.

Observaciones: Los cuerpos de Heinz, una vez teñidos, se observan como pequeñas granulaciones de color púrpura que se localizan en la periferia de los hematíes.
La primera realización de la práctica no ha salido bien ya que el colorante no estaba bien filtrado.

Resultados:

Interpretación de los resultados: La muestra de sangre que tenemos no muestra cuerpos de Heinz, lo que implica que el sujeto estudiado no tiene una Hb inestable.

Hoja de trabajo.
1.¿Cuál es el colorante usado para teñir los cuerpos de Heinz? El colorante usado es una solución de cristal violeta.
2.¿De qué color son los cuerpos de Heinz teñidos? De color púrpura.
3.¿Dónde se localizan los cuerpos de Heinz? Se localizan en la periferia de los hematíes. 

CONTAJE DE RETICULOCITOS

Fecha: 27 de noviembre,2014.

Fundamento: Observar reticulocitos al microscopio óptico mediante la tinción con colorantes vitales.

Material: Microscopio, tubos de hemólisis, pipetas Pasteur, portas, baño de agua, papel de filtro, embudo, tarro, vaso de precipitado, varilla, vidrio de reloj, balanza, probeta, parafilm y portaobjetos.

Muestra: sangre anticoagulada.

Desarrollo:
-Preparamos el colorante:

• En una probeta medimos 8o ml de solución salina y 20 ml de citrato sódico, lo vertemos en un vaso de precipitados.
• Pesamos 1 g de azul cresil brillante, lo añadimos en el vaso de precipitado y lo mezclamos con una varilla.
• Filtramos el colorante y lo añadimos a un tarro (previamente etiquetado).

-En un tubo de hemólisis echamos tres gotas dfe colorante y 3 gotas de sangre.

-Homogenizamos suavemente y lo tapamos con parafilm.

-Introducimos el tubo en el baño de agua a 37ºC durante 5 minutos.

-Pasado ese tiempo volvemos a homogenizar.

-Tomamos una gota, la colocamos en un portaobjetos y hacemos una extensión.

-Una vez seca, la colocamos en el microscopio y la observamos.

Resultados: 

Interpretación de los resultados: No se pueden observar reticulocitos ya que la sangre utilizada lleva mucho tiempo en la nevera y los resultados no son concluyentes.

Hoja de trabajo:

1.¿Qué son los reticulocitos? Los reticulocotos son hematíes maduros.

2.¿Qué tipo de tinción estamos utilizando? Una tinción supravital

3. ¿Por qué hacemos la corrección del porcentaje de reticulocitos?  Porque es un valor relativo referido a una cifra normal de hematíes. 

4.¿Qué nos expresa el IPR? Nos da un valor numérico de la estimulación hematopoyética por encima de la actividad de la línea base normal.