RECUENTO DE HEMATÍES

Fecha: 21 de noviembre,2014

Fundamento: Realizar un RBC de una muestra de sangre, con la cámara de recuento.

Material: Pipeta de Thoma, tubo de goma con boquilla, prepipeta, cámara de recuento Neubauer, cubreobjetos y microscopio.

Reactivos: Líquido de Hayem.

Muestra: sangre capilar o sangre venosa anticoagulada con EDTA.

Desarrollo:

-Humedecemos las bandas laterales del retículo de la cámara con agua destilada (para adherir bien el cubreobjetos) y colocamos el cubreobjetos sobre el retículo de la cámara.

-Colocamos el tubo de goma en la pipeta de Thoma y en la prepipeta.

-Aspiramos la sangre hasta la señal de 1 y limpiamos cuidadosamente el exterior de la pipeta sin bajar el nivel de sangre.

-Sin soltar la sangre de la pipeta Thoma, aspiramos líquido de Hayem hasta la señal de 101.

-Colocamos el dedo pulgar en la punta de la pipeta, desganchamos la goma de la pipeta y colocamos el dedo índice.

-Sujetando la pipeta con los dos dedos, agitamos suavemente la pipeta Thoma durante 2 ó 3 minutos.

-Apartamos el dedo pulgar y desechamos las 3 primeras gotas de la pipeta.

-La siguiente gota la depositamos entre la cámara y el cubreobjetos. (hay que evitar que se formen burbujas y que rebose).

-Dejamos reposar la sangre diluida de la cámara para que las células puedan sedimentarse.

-Colocamos la cámara en el microscopio, enfocamos con el objetivo de 40x y verificamos que la distribución de los hematíes es homogénea.

-Contamos los hematíes encontrados en los 4 cuadrados medianos de la esquina y el cuadrado mediano del centro.

Observaciones: El resultado no sale correcto ya que la sangre utilizada lleva mucho tiempo en la nevera y eso deteriora la cantidad de hematíes.

Resultados:

Hay que calcular el RBC con la siguiente fórmula:   RBC=Hx5x10xD

RBC=recuento de hematíes

H= hematíes contados en 5 cuadrados medianos

D= factor de dilución

RBC= (117+103+81+110+70)x5x10x100; RBC=481x5x10x100; RBC=2405000; RBC=2’405 millones/mm3

Interpretación de los resultados: Si se disminuye el RBC tenemos un caso de anemia, en cambio si el RBC tenemos un caso de policitemia. Los valores normales son entre 4 y 5 millones/mm3 en el caso de las mujeres, y entre los 4’54 y 6 millones/mm3 en el caso de los varones. En nuestro caso sale muy por debajo de lo normal lo que puede ser por tener anemia o porque la sangre lleva mucho tiempo en la nevera.

Hoja de trabajo:

1.¿Qué se debe hacer si el líquido de Hayem contiene precipitados? Hay que filtrarlo

2.¿Cuál es el volumen de sangre diluida que hay sobre cada uno de los cuadrados pequeños donde se han contado los hemtaíes? En cada uno hay 0’05mm3

3.¿Cuál es el volumen de sangre diluida que hay sobre cada uno de los cuadrados medianos donde se han contado los hematíes?

4.¿Cuál es el volumen de sangre diluida que hay sobre el cuadrado central?

5.Si la pipeta Thoma se enrasa con sangre hasta la señal de 1, ¿cuál es la dilución posteriormente obtenida?

6.¿Si la sangre se diluye a 1/200 y se cuentan 450 hematíes en 5 cuadrados medianos, ¿cuál es el RBC obtenido? RBC=450x5x10x200; RBC=4500000; RBC=4’5 millones/mm3