ESTUDIO DE LA FRAGILIDAD OSMÓTICA DE LOS HEMATÍES

Fecha: 27 de febrero, 2015

Fundamento: Evaluar la capacidad que tienen los glóbulos rojos de  soportar un incremento de su medio acuoso (soluciones de presión osmótica decrecientes).

Material: pipeta pasteur, tubos de centrífuga iguales entre sí, un reloj, una centrífuga, un espectrofotómetro, cubetas de espectrofotómetro, gradilla, micropipeta.

Reactivos:  suero fisiológico y agua destilada
Muestra: Sangre venosa adecuadamente anticoagulada.
Desarrollo: 
-Escribimos, con un rotulador de vidrio, en cada tubo un número (del 1 al 18).

-Preparamos una batería de soluciones de cloruro sódico, de la siguiente manera:

-Añadimos, en cada uno de los tubos, 1 gota (50 microlitros) de sangre.

-Agitamos los tubos suavemente y los dejamos en reposo, al menos 30 minutos y a temperatura ambiente.

-Centrifugamos los tubos a 2.000 rpm durante 5 minutos.

-Recogemos el sobrenadante de cada tubo y los colocamos en cubetas de espectrofotometría (cada uno con el mismo número que el tubo).

- Vamos colocando cada cubeta en el espectrofotómetro y anotando la absorbancia de cada uno.

Observaciones: En condiciones normales, debe apreciarse visualmente una hemólisis parcial del tubo nº 10 y una hémolisis prácticamente total a nivel de los tubos 12, 13 ó 1. Además, generalmente, el 50% de hemólisis se produce a nivel de los tubos 10 u 11.
Resultados: 

Interpretación de los resultados:  Los resultados no han salido concluyentes ya que la sangre estudiada lleva mucho tiempo en la nevera y esta hemolizada.
Hoja de trabajo
1.¿Qué concentración de NaCl tiene el suero fisiológico? Tiene una concentración del 0'9%.

2.¿En qué porcentaje se puede incrementar normalmente el volumen de los hematíes sin que éstos se rompan? En un 70% 

3.¿Qué sustancia se emplea para anticoagular la sangre en esta prueba? Se utiliza la heparina

4.En esta prueba, ¿cuál es la concentración salina menor a la que se preparan las soluciones? La concentración menor es la  de 0'5 g/l (el tubo 18).

5.En condiciones normales, ¿a qué concentración salina suele producirse una hemólisis del 50%? En las concentraciones de 4'5 g/ly 4 g/dl (tubos 10 u 11)

6.¿En qué enfermedades se produce una disminución de la ROE? Se produce en la esferocitosis hereditaria, eliptocitosis u ovalocitosis congénita y en la estomatocitosis hereditaria.