Fecha: 03 de marzo, 2015
Fundamento: Medir el tiempo que tarda en coagularse un plasma rico en problemas (PRP), obtenido a partir de una muestra de sangre anticoagulada con citrato, cuando se vuelve a recalcificar.
Material: Rotulador de vidrio, tubos de hemólisis, tubos de centrífuga, micropipeta, puntas de micropipeta, baño de agua, centrífuga, cronómetro, pipeta pasteur.
Reactivos: solución salina (0'85%), solución de cloruro cálcico 0'025 M (cloruro cálcico, 0'28g + agua destilada, 100ml) y un plasma control normal.
Muestra: Sangre anticoagulada con citrato.
Desarrollo:
-Preparamos el PRP (nuestra muestra) de la siguiente manera:
-Atemperamos los reactivos y la muestra a 37 ºC (en el baño), entre 5 y 15 minutos.
-Rotulamos, en un tubo de centrífuga una M de muestra y en otro una C de control, y los introducimos en el baño de agua.
-Depositamos, 0'1 ml de muestra en el tubo M y 0'1 ml de plasma control en el tubo C.
-Añadimos 0'1 ml de solución salina a cada uno de los tubos.
-Añadimos, a cada uno, 0'1 ml de solución de cloruro cálcico e inmediatamente ponemos en marcha el cronómetro.
-Cogemos los tubos por el extremo superior y, sin sacarlos del baño, comenzamos un movimiento de balanceo.
-Paramos el cronómetro, en el momento que se vea una aparición de un enturbiamento y de una solidificación en cada uno de los tubos.
Material: Rotulador de vidrio, tubos de hemólisis, tubos de centrífuga, micropipeta, puntas de micropipeta, baño de agua, centrífuga, cronómetro, pipeta pasteur.
Reactivos: solución salina (0'85%), solución de cloruro cálcico 0'025 M (cloruro cálcico, 0'28g + agua destilada, 100ml) y un plasma control normal.
Muestra: Sangre anticoagulada con citrato.
Desarrollo:
-Preparamos el PRP (nuestra muestra) de la siguiente manera:
- En dos tubos de centrífuga, añadimos la misma cantidad de sangre en cada uno.
- Los metemos en la centrífuga y los centrifugamos a 1.000 rpm durante 10 minutos.
- Una vez centrifugado, extraemos los tubos, recogemos el sobrenadante (plasma) y lo introducimos en un eppendorf.
-Atemperamos los reactivos y la muestra a 37 ºC (en el baño), entre 5 y 15 minutos.
-Rotulamos, en un tubo de centrífuga una M de muestra y en otro una C de control, y los introducimos en el baño de agua.
-Depositamos, 0'1 ml de muestra en el tubo M y 0'1 ml de plasma control en el tubo C.
-Añadimos 0'1 ml de solución salina a cada uno de los tubos.
-Añadimos, a cada uno, 0'1 ml de solución de cloruro cálcico e inmediatamente ponemos en marcha el cronómetro.
-Cogemos los tubos por el extremo superior y, sin sacarlos del baño, comenzamos un movimiento de balanceo.
-Paramos el cronómetro, en el momento que se vea una aparición de un enturbiamento y de una solidificación en cada uno de los tubos.
Observaciones: Los valores normales están comprendidos entre los 90 y los 130 segundos. El tiempo es mayor al normal en los déficits de factores de la via intrínseca, en situaciones de afribrinogenemia y de hiperfribinolisis, y en terapias con heparina.
Resultados:
Hoja de trabajo
1.¿Qué tipo de muestra se utiliza en esta prueba? Se utiliza un plasma rico en plaquetas (PRP).
Resultados:
Tiempo que tarda en coagular la muestra --> 2 minutos
Tiempo que tarda en coagular el control --> 1'45 minutos
Interpretación de los resultados: El tiempo de la muestra obtenido esta entre los valores normales, por lo que el tiempo obtenido es normal.Hoja de trabajo
1.¿Qué tipo de muestra se utiliza en esta prueba? Se utiliza un plasma rico en plaquetas (PRP).
2.¿A qué concentración está el CaCl2 empleado en este test? Está a una concentración de 0'025 M.
3.¿Cuáles son los valores normales del test de Howell? Los valores normales están comprendidos entre los 90 y los 130 segundos.
4.¿Qué tratamiento puede ser controlado con este test?
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