PRUEBA CRUZADA MAYOR

Fecha:  22 de mayo, 2015

Fundamento:  Enfrentar el suero del receptor con los hematíes del donante, para detectar las posibles reacciones antígeno-anticuerpo ante la sangre del donante y del receptor.

Material:  tubos de hemólisis, centrífuga, baño de agua, pipetas pasteur, gradilla

Reactivos: suero fisiológico, albúmina bovina al 30%, suero de Coombs 
Muestra:  Suero del receptor (de menos de 24 horas y conservado a 4ºC) y hematíes del donante (lavados préviamente y en una suspesión al 5%).
Desarrollo:
-En un tubo de hemólisis, depositamos una gota de la suspensión de hematíes y dos gotas del suero del receptor.
-Homogenizamos y dejamos reposar a temperatura ambiente durante 2-3 minutos.
-Centrifugamos a 3.500 rpm durante 1 minuto y observamos el resultado.
-Añadimos al tubo 3 gotas de albúmina, mezclamos bien e incubamos a 37ºC durante 30 minutos.
-Centrifugamos a 3.500 rpm durante 1 minutos y observamos el resultado.
-Lavamos los hematíes tres veces y retiramos bien todo el sobrenadante en el último lavado.
-Añadimos al tubo una gota de suero de Coombs y mezclamos bien
-Centrifugamos a 1.000 rpm durante 2 minutos y se observa los resultados.
Observaciones: En caso de que en cualquiera de las fases haya aglutinación o si se observa hemólisis, las sangres son incompatibles. 
Resultados:

Interpretación de los resultados: Existe  una ausencia de aglutinación, por lo tanto las sangres son compatibles y se puede  realizar la transfusión.
Hoja de trabajo
1.¿Qué se enfrenta en la prueba cruzada mayor? Se enfrenta el suero del receptor con los hematíes del donante.

2.¿Cuándo se debe realizar la prueba cruzada menor? Solo cuando se transfunde una gran cantidad de plasma.

3. ¿Porqué debemos realizar la prueba en medio salino y albuminoideo? Para detectar todos los anticuerpos presentes.

4. ¿Qué pone de manifiesto el suero antiglobulina de Coombs? Pone de manifiesto los anticuerpos que se hayan quedado fijados a la membrana eritrocitaria.