DETERMINACIÓN CELULAR EN TUBO

Fecha: 23 de abril, 2015

Fundamento: Observar la presencia o no de aglutinación en los hematíes problemas, al enfrentarlos a sueros conocidos que poseen anticuerpos frente a esos antígenos.

Material:  Tubos de centrífuga, rotulador de vidrio, gradilla, pipetas pasteur, pipeta, prepipeta, micropipeta, centrífuga.
Reactivos:  suero anti-A, suero anti-B, suero anti-AB y solución salina fisiológica.
Muestra:  sangre total anticoagulada
Desarrollo:  
-Primeramente realizaremos el lavado de hematíes de la siguiente manera:

• Añadimos 1 ml de sangre problema y 3 ml de solución salina en un tubo de centrífuga, en otro tubo realizamos lo mismo con otra sangre problema o  con agua destilada (para compensar la centrífuga)
• Centrifugamos la sangre a 2.000 rpm durante 4 minutos.
• Decantamos el sobrenandante.

-Una vez tengamos los hematíes, realizaremos una suspensión de hematíes al 2%: Cogeremos 100 microlitros de hematíes (la parte de abajo de el lavado de hematíes) y le añadimos 4,9 ml de solución salina (o 2 gotas de hematíes y 5 ml de solución salina).
-Rotulamos tres tubos de ensayo con las letras A, B y AB.
-Añadimos a cada tubo una gota de la suspensión de hematíes al 2% y dos gotas de suero anti-A, en el tubo A, de suero anti-B, en el tubo B, y de suero anti-AB, en el tubo AB.
-Centrifugamos los tubos durante a 1.000 rpm durante 1 minuto y observamos los tubos.
Observaciones:  Para observar si hay aglutinación o no, golpearemos suavemente el fondo de cada tubo para desprender el sedimento.

Resultados: 

Interpretación de los resultados: En observar los tubos, no existe aglutinación ninguna, por lo que nuestra sangre problema es del Grupo 0.
Hoja de trabajo
1.¿Qué tipo de técnica inmunológica se emplea en este análisis? Es la misma técnica que la determinación en porta, es decir, la aglutinación de los hematíes. 

2.¿A qué concentración se prepara la suspensión de hematíes problema? La suspensión se prepara a una concentración del 2% 

3.¿Cómo se ve una aglutinación positiva? Se observa un botón de hematíes que permanecen unidos una vez desprendido el sedimento.

4.¿A qué se debe el fenómeno Rouleaux? Se debe al no realizar el lavado previo de los hematíes problema

5.¿Cómo se pueden evitar los falsos positivos? Se pueden evitar realizando un lavado previo de los hematíes.